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離子試劑的作用原理及使用技巧

更新時(shí)間:2021-05-25 點(diǎn)擊次數(shù):1774
  離子試劑是由強(qiáng)親水離子形成,反作用于樣品分子的中性離子對(duì)。因此,可用于同時(shí)分離帶電分子和非帶電分子。離子試劑是在高效液相色譜法中引入了離子色譜方法的一種表現(xiàn)。它主要是作用于樣品和固定相之間的一種物質(zhì),所以在選擇離子試劑時(shí),要考慮色譜柱的填料和樣品的酸堿性。
 
  離子試劑的作用原理:
 
  “加入離子試劑后,它可以與待分析的物質(zhì)(多為在溶液狀態(tài)時(shí)顯以與離子試劑相反的電荷)結(jié)合成離子對(duì)而呈中性,這樣非極性就表現(xiàn)出來,從而在色譜柱上有保留行為。”
 
  離子試劑很像膠黏劑,一頭以離子吸引住待測(cè)物(也是離子),另一頭以碳鏈與固定性作用,從而把待測(cè)物保持在固定相上 。它的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn),都是因?yàn)檫@樣的特性。
 
  離子試劑的使用技巧:
 
  離子試劑不一定是表面活性劑,如己烷和庚烷磺酸鈉,又如三乙胺活四丁基溴化胺,不具表面活性作用。所以用己烷和庚烷鹽就沒有泡末,用四丁基溴化胺也不產(chǎn)生氣泡。十二烷基磺酸鈉(或硫酸鈉),或者十六烷基溴化鈉(CTAB,一種做陰離子用的陽性表面活性劑),在濃度高的時(shí)候容易產(chǎn)上泡末。做HPLC時(shí)流動(dòng)相里加的SDS或CTAB濃度一般不會(huì)太高,一般在0.1%以下,而且流動(dòng)相里有甲醇等有機(jī)溶劑,高濃度的有機(jī)溶劑有破乳的作用,因此,混合后的流動(dòng)相泡末應(yīng)該不會(huì)很多。另外,做電泳加入的SDS量很大的比如做蛋白質(zhì)SDS膠,或者毛細(xì)管電泳里的MECC,SDS濃度很高,而且沒有或者有很少比例的有機(jī)改性劑,當(dāng)然會(huì)有氣泡,跟HPLC不*相同。

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